Мазок крови при пироплазмозе собак

X Международная студенческая научная конференция Студенческий научный форум — 2018

ОСОБЕННОСТИ ДИАГНОСТИКИ ПИРОПЛАЗМОЗА СОБАК

В Российской Федерации данное заболевание регистрируется во многих регионах, от Калининградской области, Северного Кавказа до Сибири, причем последние десятилетия имеет место тенденция к увеличению заболеваемости [6].

Пироплазмоз (бабезиоз) собак – трансмиссивное природно-очаговое заболевание, протекающее остро, реже – хронически, и сопровождающееся повышением температуры до 41ºС, анемией видимых слизистых оболочек, желтушностью, гемоглобинурией, гемоглобинемией, расстройством функции сердечнососудистой, пищеварительной и нервной систем [5]. Переносчиком пироплазмоза собак на территории Российской Федерации являются клещи Dermacentor marginatus и Dermacentor pictus [2].

Целью нашего исследования явилось подробное изучение методов диагностики пироплазмоза собак.

Исследования проводились на базе кафедры инфекционных болезней, зоогигиены и ветеринарно-санитарной экспертизы ФГБОУ ВО Башкирский ГАУ и ветеринарной клиники г. Уфа.

Объектом исследования являлись собаки, больные пироплазмозом, или подозреваемые в данном заболевании.

Диагноз на пироплазмоз ставится комплексно, с учетом анамнестических и эпизоотологических данных, клинических признаков, результатов лабораторной диагностики (микроскопия мазка периферической крови, общий анализ крови, общий анализ мочи, биохимический анализ крови и др.).

Учитываются сезон года (весна–лето–осень) и эпизоотическая ситуация (отмечались ли случаи пироплазмоза в данной местности ранее). При сборе анамнестических данных уточняют, не снимали ли клещей с собаки в течение предыдущих 1-3 недель [7].

Клинические признаки. Инкубационный период болезни продолжается 6-10 сут. Заболевание характеризуется повышением температуры тела до 41-42 °С. Собаки становятся апатичными, отказываются от корма, дыхание тяжелое, учащенное. Слизистые оболочки ротовой полости и глаз гиперемированы, а затем становятся анемичными, с желтушным оттенком. Пульс слабый, нитевидный, дыхание учащенное, затруднено (до 36-48 движений в минуту). На 2-5-е сутки появляется гемоглобинурия. Животному тяжело двигаться, особенно ослабевают задние конечности, могут наступить парез и паралич. Указанные признаки регистрируют в течение 3-7 сут. Затем температура снижается до субнормальной 35-36 °С и болезнь заканчивается летально.

Хроническое течение болезни наблюдается у собак с повышенной резистентностью организма, беспородных и ранее переболевших пироплазмозом. Температура тела повышается до 40-41 °С только в первые дни болезни, затем нормализуется. Животные вялые, быстро утомляются, аппетит ухудшается. Улучшение состояния сменяется депрессией. Характерные признаки — прогрессирующая анемия и кахексия. Болезнь продолжается 3-6 нед. Выздоровление наступает медленно [1, 5].

Окончательный диагноз на пироплазмоз ставится только при обнаружении парных грушевидных форм паразита при микроскопическом исследовании мазков периферической крови [1].

Периферийную кровь у собак отбирали с внутренней поверхности ушной раковины при помощи скарификатора. Отобранная капля крови наносилась на предметное стекло, высушивалась на воздухе. Для окрашивания мазка использовали набор для быстрого дифференциального окрашивания «Дифф-квик». Приготовленные мазки просматривали под масляной иммерсией.

При микроскопии мазков Babesia canis может иметь различную форму: грушевидную, овальную, округлую, амебовидную, парную грушевидную. Все формы могут различно ассоциироваться в одном эритроците.

При постановке диагноза на пироплазмоз также проводят биохимический анализ крови и общий анализ мочи.

Общий анализ мочи указывает на наличие билирубина, белка, эритроцитов, а в тяжелых случаях в моче обнаруживают кетоны и лейкоциты, изменение рН и плотности мочи.

Во всех пробах мочи был обнаружен билирубин, что свидетельствует о поражении печени. Обнаружение эритроцитов в моче является характерным признаком пироплазмоза (при этом моча окрашивается в красно-коричневый цвет). Содержание лейкоцитов в моче отражает степень тяжести заболевания. У тяжелобольных собак в моче были обнаружены кетоновые тела, что свидетельствует о токсическом воздействии пироплазм на организм. Белок в моче является показателем нарушения функционирования почечных канальцев. Сдвиг pH в кислую сторону обусловлен распадом гемоглобина и др. белков.

Биохимическое исследование крови. У всех собак с диагнозом пироплазмоз увеличивается количество билирубина в сыворотке крови, что связано с распадом эритроцитов и высвобождением большого количества гемоглобина, распадающегося в печени до билирубина. Также в сыворотке повышаются показатели АЛТ и АСТ, что указывает на разрушение клеток печени.

У собак, больных бабезиозом, наблюдается повышение уровня мочевины в сыворотке крови, что свидетельствует о нарушении мочевинообразовательной функции в гепатоцитах. Также это указывает на уменьшение способности почек к экскреции из организма мочевины [3].

Повышение уровня креатинина в сыворотке крови больных бабезиоз собак указывает на нарушение фильтрационной способности почечных клубочков, поскольку после фильтрации в них он не реабсорбируется в почечных канальцах. Согласно этим данным у собак, больных пироплазмозом, присутствует и гепаторенальный синдром [3].

Результаты исследования. Для постановки диагноза на пироплазмоз собак необходимо провести полноценное исследование животного (клинический осмотр с обязательной термометрией, микроскопия мазков периферической крови).

Дополнительные методы диагностики – общий и биохимический анализ крови, общий анализ мочи, УЗИ и др. помогают не только поставить точный диагноз, но и определить степень интоксикации организма, повреждение тех или иных внутренних органов.

Важно помнить, что окончательный диагноз на пироплазмоз ставится только при обнаружении бабезий в эритроцитах при микроскопическом исследовании мазков периферической крови.

Библиографический список

1. Акбаев, М.Ш. Паразитология и инвазионные болезни животных [Текст]: учебник / М.Ш. Акбаев [и др.]. – М.: КолосС, 2008. – 776 с.

2. Белименко, В.В. Бабезиоз собак в Российской Федерации. [Текст] / В.В. Белименко, В.Т. Заблоцкий, П.И. Христиановский // Journal of Small Animal Practice .- 2013.- Том 4 №6.

3. Биохимические особенности проявления пироплазмоза (бабезиоза) у собак [Электронный ресурс]: Ветеринарная клиника «Любимец». – Режим доступа: http://vetsait.com/bioximicheskie-osobennosti-proyavleniya-piroplazmoza-babezioza-u-sobak

4. Мазитова, О. Распространение бабезиоза собак в Рязани и комплексная терапия [Текст] / О. Мазитова // Ветеринария сельскохозяйственных животных. – 2015. — № 11. – С. 7.

5. Практикум по диагностике инвазионных болезней животных [Текст]: практикум / М.Ш. Акбаев [и др.]. – М.: КолосС, 2006. – 536 с.

6. Темичев, К. Инвазированность клещей-переносчиков бабезиями собак [Текст] / К. Темичев // Ветеринария сельскохозяйственных животных. – 2015. — № 6. – С. 4.

7. Христиановский, П.И. Бабезиоз собак (обзор научной литературы) [Текст] / П.И. Христиановский // Инновации в сельском хозяйстве. – 2017. — № 1. – С. 7.

Источник

Пироплазмоз собак (бабезиоз). Характеристики мазков крови при бабезиозе (пироплазмозе) у собак

Бабезиоз собак — это протозойное заболевание, возбудитель которого передается при укусе собак клещами.
Данный возбудитель вызывает бабезиоз собак, который также называют пироплазмозом.

Окончательный диагноз основан на обнаружении паразитов в мазках крови. Для мерозоитов наиболее характерно парное присутствие внутри эритроцитов, они имеют форму груши и их размер достигает 4 — 5 мкм (фото 1). В данной статье мы будем говорить только о Babesia canis, которые встречаются в Европе (а также и у нас), и о Babesia gibsoni (они более мелкие и имеют круглую или овальную форму). Все способы обычной окраски позволяют визуализировать паразитов, но наиболее быстрые из них (например, Diff-Quick или RAL) намного лучше адаптированы для постановки диагноза в условиях клиники во время проведения консультации.

Фото 1. Характерные двойные грушевидные пары, персистирующие в эритроцитах.
Эритроциты содержат 4 мерозоита (окраска крови по Diff Quik, х 1000).

Отмечено, что Babesia canis можно обнаружить в неокрашенных мазках крови, но, несмотря на это, наиболее достоверным и информативным является способ быстрой окраски. В основном мерозоиты в достаточно больших количествах находятся по краям мазка и в его косичках (самой тонкой части мазка, образующейся в форме косичек при нанесении его на предметное стекло), что позволяет провести анализ в течение нескольких минут. Взятие крови из капилляров осуществляют путём надреза в области ушной раковины, так как периферическая венозная кровь в большей степени, чем центральная поражена паразитами.

Помимо обнаружения наиболее типичных грушевидных форм паразитов, представленных парами, встречаются и другие варианты Babesia canis: в фазе деления; в виде нескольких пар (по 4 и 8 мерозоитов в одном эритроците), которые обнаруживают обычно при остром течении заболевания (фото 1 и 2); в форме амёбы или аннулярные (фото 3), выявляемые, в основном, в случаях хронического течения заболевания.

Фото 2. Babesia canis в эритроцитах: много парных форм (толстая стрелка), и формы в состоянии деления (тонкие стрелки) (окраска крови по Diff Quik, х1000).

Фото 3. Babesia canis в эритроцитах: аннулярная форма (окраска крови по Diff Quik, х 1000).

Значительно реже мерозоиты обнаруживают в свободном состоянии вне эритроцитов: в данном случае они часто имеют форму кораблика, иногда кольца (фото 4). Все варьирующиеся формы паразита позволяют поставить окончательный диагноз. Несмотря на это, всегда следует быть очень осторожным, если удалось обнаружить только один мерозоит в мазке, и он не имеет соответствующей формы и/или типичной локализации. Некоторые артефакты могут привести к ошибке при постановке диагноза на бабезиоз (например: наслоение тромбоцита на эритроцит, плохая фиксация или наличие «пузырьков» внутри эритроцитов после окраски мазка, попадание на поверхность эритроцитов и предметное стекло мелких кусочков краски).

Фото 4. Восемь мерозоитов Babesia canis в свободном состоянии (окраска крови по Diff Quik, х1000).

Если исследование мазка крови не позволяет быстро выявить паразитов, то следует искать косвенные признаки, указывающие на их персистенцию в крови. Косвенные признаки проявляются в отношении эритроцитов (полихроматофилияанизоцитоз), лейкоцитов (лейкопения, мононуклеоз) и тромбоцитов (тромбоцитопения).

Несмотря на то, что картина данного заболевания характеризуется такими классическими признаками, как гипертермия, гемолиз с элементами гемоглобинурии и регенеративная анемия (полихроматофильный анизоцитоз эритроцитов, присутствие эритробластов), она не всегда имеет четкое проявление во время первого исследования (из семи иллюстраций наиболее характерная картина представлена на фото 5).

Фото 5. Эритрофагоцитоз при Babesia canis: мерозоиты визуализируются внутри фагоцитированных эритроцитов, отмечается полихроматофилия и анизоцитоз эритроцитов (окраска крови по Diff Quik, х1000).

Следовательно, отсутствие признаков регенерации в мазках крови не дает повода для прекращения поиска бабезий (пироплазм). Форма заболевания с выраженным гипергемолизом встречается приблизительно в пятнадцати процентах случаев у больных собак: в мазках крови обнаруживают признаки ярко выраженной регенерации (иногда сопровождающейся сильным лейкоцитозом), в основном свидетельствующей о гемолитической анемии, возникшей вследствие иммунной реакции. Проведение лабораторного исследования на бабезиоз осуществляют после постановки предварительного диагноза. Бывает, что после длительных поисков возбудителя в мазках крови и костном мозге удается обнаружить только одну типичную двойную форму B.canis в мазках, полученных из костного мозга собак с характерной клинической картиной заболевания.

Количество лейкоцитов в зависимости от заболевания существенно варьируется (у собак с повышенной температурой слабо выраженная взаимосвязь между лейкопенией и мононуклеозом требует обязательного ведения поиска на бабезиоз или эрлихиоз). Макрофаги являются очень характерным признаком (фото 7), если речь идет о эритрофагоцитозе (фото 5 и 6). Дифференциальный диагноз проводят между эритрофагоцитозом и морулой Ehrlichia canis. В последнем случае картина напоминает ежевику, окраска в основном базофильная и гомогенная с элементами эритрофагоцитоза (фото 6).

Фото 6. Эритрофагоцитоз при бабезиозе собак. Мерозоиты не визуализируются и дифференциальная диагностика должна быть осуществлена по наличию морулы Еhrlichia canis (окраска крови по Diff Quik, х1000).

Мононуклеоз часто присутствует при бабезиозе, и его следует отличать от лейкемии или лейкемоидной реакции, которая может сопровождаться развитием бактериальной инфекции (фото 7). В повседневной практике, если не удается выделить возбудителя, но наблюдают развитие клинических признаков заболевания, осуществляют повторное исследование мазков крови, что позволяет через несколько дней поставить окончательный диагноз. При заболевании бабезиозом можно обнаружить и выраженную нейтрофилию.

Фото 7. Мононуклеоз с множеством макрофагов в случае бабезиоза собаки (окраска крови по Diff Quik, х1000).

При бабезиозе также выражена и стабильно проявляется тромбоцитопения у 81% заболевших собак, имеющих менее 50х109 тромбоцитов/л, что соответствует как минимум трем тромбоцитам в поле зрения при исследовании мазков крови под иммерсией (х1000). На семи представленных иллюстрациях виден только один тромбоцит. По данным собственных исследований, если общий количественный показатель тромбоцитов достигает уровня менее 30х109/л, то в мазке можно видеть только один из них. Такие результаты исследований и наличие тромбоцитарного анизоцитоза свидетельствуют о бабезиозе, протекающем без проявления патогномоничных признаков, а также о многих других нарушениях, способных спровоцировать возникновение тромбоцитопении.

Источник



Исследования на пироплазмидозы животных